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ACCUTASE 細(xì)胞消化液 AT104——上海起發(fā)現(xiàn)貨

更新時(shí)間:2024-02-04      點(diǎn)擊次數(shù):1048

ACCUTASE 細(xì)胞消化液 AT104——上海起發(fā)現(xiàn)貨


細(xì)胞分離會(huì)影響體外培養(yǎng)細(xì)胞的表面蛋白和細(xì)胞表型,所以選擇合適的細(xì)胞分離方法是至關(guān)重要的。我們分離貼壁細(xì)胞常用的方法是蛋白酶消化,如胰酶消化,但是在胰酶消化的過(guò)程中大部分表面蛋白和細(xì)胞外基質(zhì)成分都會(huì)受損,而且過(guò)度酶解不僅會(huì)影響表面marker的分析,還會(huì)降低細(xì)胞活力,尤其是干細(xì)胞的活力。因此,出現(xiàn)了這款胰酶替代物——Accutase。



Accutase是一種含有蛋白水解和膠原溶解酶的細(xì)胞分離溶液,而且這些酶既不是哺乳動(dòng)物也不是細(xì)菌衍生的,因此它是不含任何動(dòng)物或細(xì)菌來(lái)源的,是胰蛋白酶-EDTA消化液的替代品,可以應(yīng)用于多種干細(xì)胞的培養(yǎng)及消化傳代、海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)、神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)等。由于Accutase較為溫和,分離后的細(xì)胞能保持完好的表面抗原,因此在分離細(xì)胞系以進(jìn)行持續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞表面標(biāo)志物分析、病毒生長(zhǎng)測(cè)定、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖和腫瘤細(xì)胞遷移測(cè)定方面非常有效。



與胰酶相比,具有以下優(yōu)勢(shì):




  1. 同時(shí)具備蛋白酶和溶膠原活性,適合大部分細(xì)胞的消化,應(yīng)用范圍更為廣泛;

  2. 消化更溫和,不會(huì)破壞細(xì)胞表面抗原,能夠維持細(xì)胞最大的活力;

  3. 不需清洗或中和反應(yīng),加入培養(yǎng)基即可使Accutase酶失活,節(jié)省細(xì)胞傳代時(shí)間



產(chǎn)品描述

Accutase是包含有蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液,是胰酶/EDTA消化液的替換產(chǎn)品,用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿和粘附培養(yǎng)器皿中消化細(xì)胞。適用于組織解離和細(xì)胞分離,因分離后的細(xì)胞能保持完好的表面抗原,且不含任何動(dòng)物或者細(xì)菌來(lái)源組分,可滿足對(duì)后續(xù)如細(xì)胞表面標(biāo)記、病毒生長(zhǎng)分析、流式細(xì)胞分析以及生物反應(yīng)器相關(guān)檢測(cè)等多種實(shí)驗(yàn)的要求。

與傳統(tǒng)的胰酶消化液相比,本品具有以下優(yōu)勢(shì):

1)適用于絕大多數(shù)原代細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的消化,以及昆蟲(chóng)細(xì)胞;

2)溫和有效的消化干細(xì)胞(hESCs和mESCs),凍存后細(xì)胞具更高復(fù)蘇率;

3)幾分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)粘附細(xì)胞的分離,不需清洗或中和反應(yīng),節(jié)省細(xì)胞傳代時(shí)間;

4)對(duì)細(xì)胞消化較為溫和,能增加細(xì)胞產(chǎn)量和存活率;增強(qiáng)細(xì)胞貼壁效率;改善細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞生長(zhǎng)特性等。

本品為即用型的無(wú)菌產(chǎn)品,溶于Dulbecco’s PBS(含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚紅),比活力≥200 u/mL,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

 

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。收到后請(qǐng)于-20 ℃保存,有效期2年。2~8 ℃保存,有效期2個(gè)月。

 

注意事項(xiàng)

1)Accutase融化后4 ℃保存,至少2個(gè)月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量,放到-80℃凍存,至少6個(gè)月穩(wěn)定。

2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3)本產(chǎn)品僅作科研用途!

 

使用方法

1. 4 ℃或冰浴融解Accutase,之后進(jìn)行分裝保存。

【注】:不可37 ℃融化本品,否則會(huì)影響酶活。

2. 使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤(rùn)洗細(xì)胞一次;

3. 以無(wú)菌操作的方式,按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細(xì)胞;

4. 重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi),消化5-10 min;

【注】:消化時(shí)間可自行調(diào)整。大部分細(xì)胞處于Accutase中高達(dá)1小時(shí),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)無(wú)影響。

5. 消化結(jié)束后,輕輕敲擊培養(yǎng)皿,使細(xì)胞與皿底部脫離,依照常規(guī)操作進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和傳代。

【注】:不需另做清洗和酶活終止步驟。




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